产品货号:
YTB3560
中文名称:
SDS-PAGE凝胶超快速制备试剂盒(10%)
英文名称:
10% SDS-PAGE Gel SuperQuick Preparation Kit
产品规格:
30-50块胶
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒提供了简单而又超快速地制备10% SDS-PAGE凝胶所需的所有试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制10% SDS-PAGE凝胶。
本试剂盒把SDS-PAGE凝胶配制所需的Tris-HCl、Acr-Bis(29:1)、SDS等预混合成下层胶预混液和上层胶预混液,使用前仅需加入适量10%凝胶聚合催化剂和TEMED Substitute即可简单快速地完成下层胶(分离胶)和上层胶(浓缩胶)的配制。
SDS-PAGE凝胶超快速制备试剂盒系列产品有6%、8%、10%、12%和15%共5种常见浓度供您选择,也可以考虑选购可以配制各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒(货号:YT048)。
组分 | 规格 |
10% SDS-PAGE下层胶预混液 | 250mL |
SDS-PAGE上层胶预混液 | 120mL |
凝胶聚合催化剂 | 0.5g |
TEMED Substitute | 0.5mL |
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
本试剂盒约可配制30-50块常规大小的10% SDS-PAGE凝胶。具体可配制的凝胶数量与凝胶的厚薄及大小有关。
- 两种预混液及TEMED Substitute均需4℃避光保存。凝胶聚合催化剂更宜室温保存,4℃保存时需拧紧瓶盖注意防潮,受潮后会很快失效。凝胶聚合催化剂用水配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效,同时应尽量减少室温存放时间,以防失效。推荐凝胶聚合催化剂每次均少量配制,并尽量使用较新鲜配制的10%凝胶聚合催化剂溶液。
- 下层胶预混液和上层胶预混液中含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
- TEMED Substitute易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节凝胶聚合催化剂和TEMED Substitute的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
- TEMED Substitute易燃,有腐蚀性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其他物品。
- 根据目的蛋白的分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE下层胶(即分离胶)。
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下:SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50~150kD 8%胶 30~90kD 10%胶 20~80kD 12%胶 12~60kD 15%胶 10~40kD - 称取适量凝胶聚合催化剂,用双蒸水或其它高纯度的水配制10%凝胶聚合催化剂溶液。例如称取0.1g凝胶聚合催化剂,用高纯度水溶解并定容到1mL即为10%凝胶聚合催化剂溶液。凝胶聚合催化剂溶液容易失效,具体请参考注意事项中相关说明。
- 参考下表,在10% SDS-PAGE下层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%凝胶聚合催化剂溶液,按照0.04%的比例加入相应量的TEMED Substitute。例如10mL 10%SDS-PAGE下层胶预混液中,加入100μL 10%凝胶聚合催化剂溶液和4μL TEMED Substitute。适当混匀后倒入到制胶模具中,用异丙醇、0.1% SDS或蒸馏水封住液面,直至下层胶凝固充分。通常10~30分钟内胶会凝固。
注:具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%凝胶聚合催化剂和TEMED Substitute的正常推荐用量是室温为25℃时的推荐用量。为达到与25℃时相近的凝固时间,当室温低于25℃时,可以适当同时加大10%凝胶聚合催化剂和TEMED Substitute的用量,例如20℃时建议用量是正常推荐用量的1.5倍,15℃时建议用量是正常推荐用量的2倍。成分 配制不同体积SDS-PAGE下层胶所需各成分的体积(mL) 10% SDS-PAGE下层胶预混液 5 10 15 20 30 50 10%凝胶聚合催化剂 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5 TEMED Substitute 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02 - 参考下表,在下层胶凝固后,在SDS-PAGE上层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%凝胶聚合催化剂溶液,按照0.1%的比例加入相应量的TEMED Substitute。例如10mL SDS-PAGE上层胶预混液中,加入100μL 10%凝胶聚合催化剂溶液和10μL TEMED Substitute,适当混匀。去除下层胶上面覆盖的液体,尽量去干净,然后倒入添加了10%凝胶聚合催化剂溶液和TEMED Substitute的SDS-PAGE上层胶预混液,插入梳子待凝固。上层胶凝固后,则表明制胶步骤结束,可以准备进行后续的电泳了。
成分 配制不同体积SDS-PAGE上层胶所需各成分的体积(mL) SDS-PAGE上层胶预混液 2 3 4 6 8 10 10%凝胶聚合催化剂 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1 TEMED Substitute 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01 - 配制好的凝胶如果当天不能使用,可以在4℃保存1~2天后使用。
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